Moleculaire biologie
Hoofdstuk 1
1.1: Definitie
Definitie “wat is leven?” => geen simpele definitie…
Wikipedia: leven is een open fysico-chemisch systeem dat door middel van uitwisseling van energie
en materie met de omgeving en door inwendig metabolisme in staat is om zich in stand te houden, te
groeien en zich aan te passen aan zijn omgeving op zowel korte als lange termijn.
Cel is basiseenheid van leven en alle levende organismen
o Tot nu toe onmogelijk om cellen te laten ontstaan uit niet-cellulair materiaal
1.2: Cellulaire organisatie van cellen
Alle organismen bestaan uit cellen
Cellen zijn basiseenheid van leven
Cellen ontstaan uit cellen
o Cel delen in 2 dochtercellen
Prokaryote en Eukaryote cellen
Er zijn één- en meercellige eukaryoten
Meeste cellen zijn te klein om met het
blote oog te bestuderen
o Prokaryote cel is 1-enkele µm
o Eukaryote cel is 10 – 50 µm
, 1.3: Microscopie (enkel basisprincipes te kennen)
1.3.1: Inleiding
Menselijk oog heeft slechts resolutie van 100 µm, de lichtmicroscoop 100 nm.
Resolutie = minimumafstand tussen 2 punten zodat die nog als afzonderlijke punten te zijn door een
microscoop. Hoe kleiner die afstand, hoe hoger de resolutie.
1.3.2: Lichtmicroscopie
lichtmicroscoop
o Focus op preparaat
o Via lenzen
Optieke resolutie
o Bright-field microscoop
o Contrast door verschillend hoeveelheid absorptie
Mogelijkheid tot kleuring van cellen voor groter contrast
o Doel: voldoende vergroting en contrast
o Afhankelijk van lichtintensiteit
o Kleine objecten onderscheiden
o Cellen
o Grotere subcellulaire organellen
Nucleus
Chloroplasten
Mitochondria
…
Fasecontrastmicroscoop
o Variatie in densiteit of dikte tussen delen vd cel
=> intersiteitsverschillen
Fluorescentiemicroscoop
o Zeeg gevoelig
o Bestuderen van intracellulaire locatie van moleculen
Molecule van interesse w. gemerkt met fluorescent label/ fluorescent eiwit
=> absorptie van licht v. specifieke golflengte en stuurt langere golflengte
licht terug