Evo-devo practicum uitwerkingen Evolutiebiologie 2

Evo-devo practicum Tribolium




Inleiding




1

, Het doel van dit practicum is het ontwikkelingsgen in de larven van Tribolium Castaneum
uitschakelen. Dit doen we door dubbelstrengs RNA te injecteren in de ouders waardoor een
specifiek mRNA wordt uitgeschakeld. Het mRNA zal binden aan het inmiddels geknipte
enkelstrengs RNA en hierdoor uitschakelen. Doordat ons dubbelstrengs RNA een rode kleur
heeft zullen we dit hopelijk terug zien in de geïnjecteerde ouders, hun eieren en vervolgens
ook in de larven. Als het ontwikkelingsgen uitgeschakeld is dan zal dit ook resulteren in een
morfologische afwijking. Meelkevers bestaan uit verschillende segmenten bij hun abdomen.
Uit 3 van deze segmenten komen normaal poten, maar met de uitschakeling worden dat
ofwel 0 ofwel alle segmenten waar poten ontstaan.




Materiaal

- Grove zeef (600-850 um) en fijne zeef (250-300 um)
- Stereomicroscoop
- Pincet
- Petrischaaltjes
- Objectglaasje
- Lijm
- Dekglaasje
- Hamilton injectiespuit
- Meel
- Incubator
- Penseeltje
- Water
- Bleek
- Klein zeefje
- Pipet
- Gevouwen papier
- Papier
- Melkzuur
- Lichtmicroscoop (Primo Star Zeiss 4)
- Telefoon/ camera




Methode



2