Concentratie FCS stimuleert
groei Jurkat cellen.
B04BLP celkweek rapportage
Student:
Klas: LM1G2
Datum: 14 juni 2021
Docent: Marian Bolk
, Doel experiment
Het doel van het experiment is om te kijken naar het effect van foetaal calfserum (FCS) op de
groei van de Jurkat cellen.
Hypothese
FCS bevat factoren die onder andere de groei bevorderen, dus met toevoeging van FCS aan
het groeimedium zullen de Jurkat cellen ook beter groeien. De cellen die zijn gekweekt met
10% FCS in het medium zullen beter groeien dan de cellen met 2% in het medium. Een te
hoog percentage kan schadelijk zijn voor de cellen, waardoor de cellen met 20% FCS in het
medium minder goed zullen groeien en er zullen ook meer dode cellen te vinden zijn dan in
het medium met 10% FCS.(3)
Principes
FSC:
Foetaal kalfsserum (FCS) is een universeel groeisupplement van cel- en weefselkweekmedia.
Het bevat de meeste factoren die nodig zijn voor onder andere cel hechting en groei en
Daarnaast is het effectief voor de meeste menselijke en dierlijke cellen. (1,3)
Trypaanblauw:
Trypaanblauw is een blauwe kleurstof die enkel de dode cellen aankleurt, dit zodat de dode
cellen van de levende cellen onderscheiden kunnen worden. Levende cellen hebben een
intact celmembraan hierdoor kan de trypaanblauw niet in de cel komen en blijft deze
kleurloos. Bij dode cellen is het celmembraan permeabel en hierdoor kan de trypaanblauw
reageren met de membraaneiwitten. (4)
Proefopzet
Bij de FCS proef worden Jurkat cellen doorgezet in groeimedium met daarin verschillende
concentraties FCS. Er worden, van tevoren berekende, hoeveelheden cellen toegevoegd aan
een groeimedium zonder FCS. FCS wordt hierna in de juiste hoeveelheid toegevoegd om zo
concentraties te hebben van 2%, 10% en 20%. Als controle worden de cellen ook nog
doorgezet zonder FCS en in duplo. De verschillende concentraties FCS met daarin de cellen
worden in een 24-wells plaat gepipetteerd en geïncubeerd.
Na incubatie worden de cellen gekleurd met trypaanblauw en met behulp van Bürker
telkamer geteld. Met een berekening worden de concentraties cellen berekend. Statistiek
wordt toegepast om betrouwbaar te kijken of er een significant verschil is in concentraties.
2
groei Jurkat cellen.
B04BLP celkweek rapportage
Student:
Klas: LM1G2
Datum: 14 juni 2021
Docent: Marian Bolk
, Doel experiment
Het doel van het experiment is om te kijken naar het effect van foetaal calfserum (FCS) op de
groei van de Jurkat cellen.
Hypothese
FCS bevat factoren die onder andere de groei bevorderen, dus met toevoeging van FCS aan
het groeimedium zullen de Jurkat cellen ook beter groeien. De cellen die zijn gekweekt met
10% FCS in het medium zullen beter groeien dan de cellen met 2% in het medium. Een te
hoog percentage kan schadelijk zijn voor de cellen, waardoor de cellen met 20% FCS in het
medium minder goed zullen groeien en er zullen ook meer dode cellen te vinden zijn dan in
het medium met 10% FCS.(3)
Principes
FSC:
Foetaal kalfsserum (FCS) is een universeel groeisupplement van cel- en weefselkweekmedia.
Het bevat de meeste factoren die nodig zijn voor onder andere cel hechting en groei en
Daarnaast is het effectief voor de meeste menselijke en dierlijke cellen. (1,3)
Trypaanblauw:
Trypaanblauw is een blauwe kleurstof die enkel de dode cellen aankleurt, dit zodat de dode
cellen van de levende cellen onderscheiden kunnen worden. Levende cellen hebben een
intact celmembraan hierdoor kan de trypaanblauw niet in de cel komen en blijft deze
kleurloos. Bij dode cellen is het celmembraan permeabel en hierdoor kan de trypaanblauw
reageren met de membraaneiwitten. (4)
Proefopzet
Bij de FCS proef worden Jurkat cellen doorgezet in groeimedium met daarin verschillende
concentraties FCS. Er worden, van tevoren berekende, hoeveelheden cellen toegevoegd aan
een groeimedium zonder FCS. FCS wordt hierna in de juiste hoeveelheid toegevoegd om zo
concentraties te hebben van 2%, 10% en 20%. Als controle worden de cellen ook nog
doorgezet zonder FCS en in duplo. De verschillende concentraties FCS met daarin de cellen
worden in een 24-wells plaat gepipetteerd en geïncubeerd.
Na incubatie worden de cellen gekleurd met trypaanblauw en met behulp van Bürker
telkamer geteld. Met een berekening worden de concentraties cellen berekend. Statistiek
wordt toegepast om betrouwbaar te kijken of er een significant verschil is in concentraties.
2
