Inhoud
Analysemethoden ..................................................................................................................2
Monstervoorbereiding............................................................................................................8
Chromatografie ....................................................................................................................11
HPLC .....................................................................................................................................15
Gaschromatografie ...............................................................................................................20
AAS.......................................................................................................................................25
Infraroodspectrometrie ........................................................................................................35
1
,Samenvatting Analysemethoden I Nienke Hoitink
Analysemethoden
Hoe kleiner de golflengte, hoe hoger de meer energie.
Elektromagnetische straling beschreven als een golf
• Golven
o Elektrische component
o Magnetische component
• Kenmerken golf → golflengte, frequentie, golfgetal en amplitude
1
• 𝑐 = 𝜆∗𝑓 𝜎= 𝜆
Fotonen
• Licht is een verzameling energiepakketjes → fotonen
• Energie staat in relatie met frequentie (en golflengte en golfgetal), wet van Planck:
o 𝐸 =ℎ∗𝑓
o Constante van Planck is 6,626*10-34
• Interactie met materie levert absorptie en emissie (microniveau)
• Microniveau levert → absorptie, reflectie, polarisatie, breking, dispersie, buiging en
interferentie
Eigenschappen van elektromagnetische straling polarisatie
2
,Samenvatting Analysemethoden I Nienke Hoitink
Eigenschappen van elektromagnetische straling
Stralingsprocessen; absorptie
• UV of zichtbaar licht
• Overgang elektron naar hoger energieniveau
o Fotonenergie → dE = E1-E0 = h*f
o Molecuul wordt aangeslagen →
E0→E1
• IR straling of microgolven
• Molecuulvibratie of rotatie
o Rek- en buigvibratie
o Symmetrische en asymmetrische
vibratie
Stralingsprocessen; emissie
Opgenomen energie van EM straling komt vrij door:
1. Vibrationele relaxatie
a. Energie overdracht op andere deeltjes via botsingen
b. Stralingsloos
2. Fotoluminescentie
a. Energie over dracht op andere deeltjes via botsingen
b. Daarna emissie foton = straling
c. Gebruikt in analytische (bio)chemie → koppelen van fluorescente labels aan
bv DNA
Moleculaire absorptie
Absorptie van EM straling door moleculen leidt tot:
• Elektronenovergang
• Vibratie
• Rotatie
3
, Samenvatting Analysemethoden I Nienke Hoitink
Verschil moleculaire/atomaire absorptie
Moleculaire absorptie
• Wijde bandbreedte in spectra (10-100nm)
• Overlap spectra verschillende stoffen
• Continu spectrum
Atomaire absorptie
• Scherpe lijnen in spectra (~0,001nm)
• Bijna geen overlap spectra verschillende
elementen
Stralingsprocessen
Wat gebeurt er met door moleculen geabsorbeerde straling? (toetsstof)
• Gammastraling → meeste energie → meeste kapotmaken → atomen kapot maken
o Interactie met de kern als de energie sterk genoeg is
• X-rays
o Moleculen kapot
o Breken van verbindingen en ionisatie (moleculen krijgen lading)
• UV
o Elektronen worden aangeslagen → van de ene schil naar de andere schil
o Fluorescentie
• IR
o Atomen gaan vibreren en roteren over bindingen
Transmissie = doorlaten
Absorptie = opnemen
UV-VIS
Kwantitatieve chemische analyse
• 250-750nm
• <400nm UV
• 390-750 zichtbaar licht (VIS)
4