DNA modificatie
SAMENVATTING, PERIODE 2.1
Cheyenne van Kraaij
AVANS HOGESCHOOL
,Doelstellingen
Leerdoel 1
Je kan de structuur en fysische eigenschappen van DNA en RNA beschrijven.
(BAS: body of knowledge: moleculaire biologie, celbiologie, biochemie).
Leerdoel 2
Je kan het gedrag van DNA- en RNA-moleculen tijdens het transcriptie- en translatieproces
beschrijven en ook tijdens verschillende experimentele handelingen (o.a. nucleïnezuur isolatie, PCR)
beschrijven.
(BAS: body of knowledge: moleculaire biologie, celbiologie, biochemie)
Leerdoel 3
Je kan de werking van restrictie-enzymen beschrijven, je kan het resultaat van een geknipt
DNA-fragment tekenen/beschrijven.
Je kan de werking van de verschillende enzymen die een rol spelen tijdens een klonering
beschrijven.
Je kan PCR-protocollen opstellen en aanpassen (body of knowledge moleculaire biologie)
Je kan de Sanger Sequencing techniek beschrijven en aangeven wanneer deze analyse
toegepast kan worden.
Je kan de elementen die een rol spelen bij transcriptie en translatie in een eukaryoot en
prokaryoot modelsysteem benoemen en hun functie beschrijven.
(BAS: body of knowledge: moleculaire biologie, celbiologie, biochemie)
Leerdoel 4
Je kan benoemen of primers geschikt zijn voor gebruik gebruikmakend van termen als de smelt- en
annaelingstemperatuur, het %GC, de delta G, etc.
(BAS: body of skills: informatievaardigheden, BAS: body of knowledge: moleculaire biologie,
celbiologie, biochemie).
Leerdoel 5
Je maakt kennis met het zoeken en lezen van wetenschappelijke literatuur, je presenteert een zelf
geselecteerd wetenschappelijk artikel.
(BAS: body of skills informatievaardigheden, sociale en communicatieve vaardigheden).
1
,Inhoud
Doelstellingen.........................................................................................................................................1
DNA modificatie les 1 – Samenvatting DNA en DNA isolatie..................................................................3
DNA Isolations......................................................................................................................................11
DNA modificatie les 2 – Samenvatting..................................................................................................18
Polymerase chain reaction...................................................................................................................20
DNA modificatie les 3 – samenvatting..................................................................................................26
DNA modificatie – Restrictie enzymen, les 4........................................................................................27
Pearson chapter 2.............................................................................................................................27
Samenvatting les 5 – DNA modificatie..................................................................................................31
Opgave les 5 -Inclusief kennen.............................................................................................................34
2
, DNA modificatie les 1 – Samenvatting DNA en DNA
isolatie
Redenen/voorbeelden om DNA te modificeren:
• Stier Herman
In het DNA van Herman werd een stukje menselijk DNA ingebouwd, waardoor vrouwelijke
nakomelingen melk met de menselijke versie van
hetontstekingsremmende eiwit lactoferrine zouden produceren.
• Muggen zo gemodificeerd dat vrouwelijke nakomelingen het niet overleven (malaria)
• Muizen met ”humane oren”.
• Virus etende bacteriën
In deze cursus leer je de technieken die nodig zijn om DNA te kunnen aanpassen. Denk hierbij aan:
DNA isolaties
Amplificatie technieken en primer desgin om gewenst DNA te vermeerderen
DNA Digestie en Ligatie (=knippen & plakken) technieken
Selectie van de juiste mutanten
Transcriptie is het proces dat van het DNA van een gen een complementaire kopie maakt bestaande
uit mRNA. Bij de eiwitsynthese wordt tijdens de transcriptie mRNA geproduceerd, dat vervolgens
door middel van de translatie wordt 'vertaald' naar een eiwit. Messenger RNA is een vorm van RNA
die als 'boodschapper' (messenger) twee processen met elkaar verbindt: de transcriptie, waarbij een
stuk DNA (een gen) overgeschreven wordt tot mRNA, en de translatie, waarbij het mRNA wordt
vertaald naar een keten van aminozuren (een eiw).
Schematisch: DNA— transcriptie → mRNA — translatie → eiwit
Het onbewerkte RNA, zoals dat direct na de
transcriptie gevormd wordt, wordt dan pre-
mRNA genoemd. Het bewerkte RNA, zoals
dat getransleerd wordt, wordt gewoon
mRNA genoemd. Het schema ziet er nu als
volgt uit:
DNA — transcriptie→ pre-mRNA — RNA-
processing, splicing, RNA-editing of
alternatieve splicing → mRNA — translatie
→ eiwit
3
SAMENVATTING, PERIODE 2.1
Cheyenne van Kraaij
AVANS HOGESCHOOL
,Doelstellingen
Leerdoel 1
Je kan de structuur en fysische eigenschappen van DNA en RNA beschrijven.
(BAS: body of knowledge: moleculaire biologie, celbiologie, biochemie).
Leerdoel 2
Je kan het gedrag van DNA- en RNA-moleculen tijdens het transcriptie- en translatieproces
beschrijven en ook tijdens verschillende experimentele handelingen (o.a. nucleïnezuur isolatie, PCR)
beschrijven.
(BAS: body of knowledge: moleculaire biologie, celbiologie, biochemie)
Leerdoel 3
Je kan de werking van restrictie-enzymen beschrijven, je kan het resultaat van een geknipt
DNA-fragment tekenen/beschrijven.
Je kan de werking van de verschillende enzymen die een rol spelen tijdens een klonering
beschrijven.
Je kan PCR-protocollen opstellen en aanpassen (body of knowledge moleculaire biologie)
Je kan de Sanger Sequencing techniek beschrijven en aangeven wanneer deze analyse
toegepast kan worden.
Je kan de elementen die een rol spelen bij transcriptie en translatie in een eukaryoot en
prokaryoot modelsysteem benoemen en hun functie beschrijven.
(BAS: body of knowledge: moleculaire biologie, celbiologie, biochemie)
Leerdoel 4
Je kan benoemen of primers geschikt zijn voor gebruik gebruikmakend van termen als de smelt- en
annaelingstemperatuur, het %GC, de delta G, etc.
(BAS: body of skills: informatievaardigheden, BAS: body of knowledge: moleculaire biologie,
celbiologie, biochemie).
Leerdoel 5
Je maakt kennis met het zoeken en lezen van wetenschappelijke literatuur, je presenteert een zelf
geselecteerd wetenschappelijk artikel.
(BAS: body of skills informatievaardigheden, sociale en communicatieve vaardigheden).
1
,Inhoud
Doelstellingen.........................................................................................................................................1
DNA modificatie les 1 – Samenvatting DNA en DNA isolatie..................................................................3
DNA Isolations......................................................................................................................................11
DNA modificatie les 2 – Samenvatting..................................................................................................18
Polymerase chain reaction...................................................................................................................20
DNA modificatie les 3 – samenvatting..................................................................................................26
DNA modificatie – Restrictie enzymen, les 4........................................................................................27
Pearson chapter 2.............................................................................................................................27
Samenvatting les 5 – DNA modificatie..................................................................................................31
Opgave les 5 -Inclusief kennen.............................................................................................................34
2
, DNA modificatie les 1 – Samenvatting DNA en DNA
isolatie
Redenen/voorbeelden om DNA te modificeren:
• Stier Herman
In het DNA van Herman werd een stukje menselijk DNA ingebouwd, waardoor vrouwelijke
nakomelingen melk met de menselijke versie van
hetontstekingsremmende eiwit lactoferrine zouden produceren.
• Muggen zo gemodificeerd dat vrouwelijke nakomelingen het niet overleven (malaria)
• Muizen met ”humane oren”.
• Virus etende bacteriën
In deze cursus leer je de technieken die nodig zijn om DNA te kunnen aanpassen. Denk hierbij aan:
DNA isolaties
Amplificatie technieken en primer desgin om gewenst DNA te vermeerderen
DNA Digestie en Ligatie (=knippen & plakken) technieken
Selectie van de juiste mutanten
Transcriptie is het proces dat van het DNA van een gen een complementaire kopie maakt bestaande
uit mRNA. Bij de eiwitsynthese wordt tijdens de transcriptie mRNA geproduceerd, dat vervolgens
door middel van de translatie wordt 'vertaald' naar een eiwit. Messenger RNA is een vorm van RNA
die als 'boodschapper' (messenger) twee processen met elkaar verbindt: de transcriptie, waarbij een
stuk DNA (een gen) overgeschreven wordt tot mRNA, en de translatie, waarbij het mRNA wordt
vertaald naar een keten van aminozuren (een eiw).
Schematisch: DNA— transcriptie → mRNA — translatie → eiwit
Het onbewerkte RNA, zoals dat direct na de
transcriptie gevormd wordt, wordt dan pre-
mRNA genoemd. Het bewerkte RNA, zoals
dat getransleerd wordt, wordt gewoon
mRNA genoemd. Het schema ziet er nu als
volgt uit:
DNA — transcriptie→ pre-mRNA — RNA-
processing, splicing, RNA-editing of
alternatieve splicing → mRNA — translatie
→ eiwit
3
