HPLC: Hoofdstuk 10
- Het scheidt de componenten van mengsel door gebruik te maken van verschillen in
hun interacties met mobiel en stationaire fasen
- De scheiding is gebaseerd op verschillende fysische-chemische eigenschappen
zoals polariteit, molecuulgrootte en ionische lading.
Componenten van HPLC
Reservoir voor de mobiele fase Bevat het oplosmiddel of de mengsels van de
oplosmiddelen die door het systeem worden
gepompt
Pompen Ze pompen de mobiele fase door het systeem bij
een constante en gecontroleerde snelheid en druk
Hoge druk is nodig om de mobiele fase door de
kolom te voeren.
= Mobiele fase stuwen door de kolom
Injector Het introduceert het monster in de mobiele fase.
Injectie kan handmatig of automatisch gebeuren.
Kolom Bevat de stationaire fase en is het hart van het
HPLC systeem.
De kolom is meestal gevuld met kleine deeltjes van
een gepakt materiaal zoals silica of polymeren
Detector Signaal van gescheiden componenten
, Werking van HPLC:
Stap 1 Injectie van het monster: Het monster wordt in de mobiele fase geïnjecteerd
en door de hoge druk de kolom ingevoerd.
Stap 2 Scheiding van het monster: Terwijl het monster door de kolom beweegt,
worden de componenten gescheiden op basis van hun interactie met de
stationaire fase en de mobiele fase.
Stap 3 Detectie van componenten: De gescheiden componenten passeren de
detector, die hun aanwezigheid en hoeveelheid registreert.
Stap 4 Chromatogram-analyse: Het data-acquisitiesysteem genereert een
chromatogram, waarbij elke piek overeenkomt met een gescheiden
component.
De retentietijd (tijd die een component nodig heeft om door de kolom te
bewegen) en de piekoppervlakte worden gebruikt om de componenten te
identificeren en te kwantificeren.
- Het scheidt de componenten van mengsel door gebruik te maken van verschillen in
hun interacties met mobiel en stationaire fasen
- De scheiding is gebaseerd op verschillende fysische-chemische eigenschappen
zoals polariteit, molecuulgrootte en ionische lading.
Componenten van HPLC
Reservoir voor de mobiele fase Bevat het oplosmiddel of de mengsels van de
oplosmiddelen die door het systeem worden
gepompt
Pompen Ze pompen de mobiele fase door het systeem bij
een constante en gecontroleerde snelheid en druk
Hoge druk is nodig om de mobiele fase door de
kolom te voeren.
= Mobiele fase stuwen door de kolom
Injector Het introduceert het monster in de mobiele fase.
Injectie kan handmatig of automatisch gebeuren.
Kolom Bevat de stationaire fase en is het hart van het
HPLC systeem.
De kolom is meestal gevuld met kleine deeltjes van
een gepakt materiaal zoals silica of polymeren
Detector Signaal van gescheiden componenten
, Werking van HPLC:
Stap 1 Injectie van het monster: Het monster wordt in de mobiele fase geïnjecteerd
en door de hoge druk de kolom ingevoerd.
Stap 2 Scheiding van het monster: Terwijl het monster door de kolom beweegt,
worden de componenten gescheiden op basis van hun interactie met de
stationaire fase en de mobiele fase.
Stap 3 Detectie van componenten: De gescheiden componenten passeren de
detector, die hun aanwezigheid en hoeveelheid registreert.
Stap 4 Chromatogram-analyse: Het data-acquisitiesysteem genereert een
chromatogram, waarbij elke piek overeenkomt met een gescheiden
component.
De retentietijd (tijd die een component nodig heeft om door de kolom te
bewegen) en de piekoppervlakte worden gebruikt om de componenten te
identificeren en te kwantificeren.
