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Summary - Bioanalysis (WBFA032-05)

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4
Publié le
30-01-2025
Écrit en
2023/2024

A comprehensive summary of the course 'Bioanalysis' from the Bachelor Pharmacy at the Rijksuniversiteit Groningen. Contains the important details and information that you need to know for the exam.

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Publié le
30 janvier 2025
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2023/2024
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Resume

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CH1 +
2 hydrophobic

Liquid-liquid extraction organic & neutral species
phase uncharged


organise
:




to enrich and purify low MW aqueous phase water & species EXAMPLE
charged
:



b
substances
hydrophilic you have neutral and basic
arug a



compound , add a salt to protonate
org
P
LLE determined by distribution coefficient Caq the The will be
·
base. base
charged
=




↳ influenced F e
by .
. PH and is the
aqueous phase

faq
·
fraction forg + = 1



·
Optimize extraction
yield by
:




adjust pH of
aqueous phase
-




monculesdriven out
-salting out > add salt to make
aqueous phase more
hydrophilic ->
organic of
ag
-




ion-pair extraction > neutralize permanent charge by adding hydrophobic counter ion form
-


to
-




con pairs >
-
can be extracted

conditioning same
steent
Maching en
Solid phase extraction SPE
:




Immina
4 steps in


.
1
conditioning >
-
to activate appropriate sides for absorption
·de
2 . sample addition

3.

ringing - to remove interferences + other matrix constituents


that phase
greater activity
election with solvent has for for bonded
4 .
->
analyte than




Ch 3 .
+ 4

Ligand binding assays measures
+X
>
- interaction between 2 molecules

antibodynor
determine
ligand-receptor (/antibody)
·
suitable for molecules precense & extent formed
large of complexes or
ligand



electrochemically or fluorescently
·

equilibrium constant Ka = c
·
Po = Bmax =
total amount of immobilized antibody/receptor
O
-Kp .

Po -

Ko .

(PX]

·
Bmax =

graph cuts Xas




·
ELISA for protein identification heterogene
assay >
= -




1 for detection




I
· EMIT =

enzyme multiplied immunoassay technique

high concentration of in sample to open active site Since there isn't antibody to block this binding
drug .
enough
site , a
signal causes product formation
4
substrates color bind active site
change when to




Fluorescence polarization by depolarization of
homogene
·

light >
-




·
FRET fuorescence resonance transfer how 2 molecules are
energy
> close
together
= -




Mass
accordingly
> in
spectrometry separates ions their mass-to-charge ratio (m/2) the
gas phase
-

to


for analysis of complex samples Steps :




MW . sample introduction (liquid desorption ; direct infusion can othera
be
both high How 1
gas chromatography ;
-

or

way
.
2 ionization - to
charge the molecules

Small
droplet field
Conisation (ESI) is become t electric
4
electrospray narrow
capillary end plate charged ions because
strong
=
, ,




↳ MALDI ,
APCI ,
El , Cl , PI (MALDI :

generates gas phase ions from a sample in solid state
by energy transfer from a laser beam


.
3 m/2 separation

u data
.




processing
€3,98
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