Hoofdstuk 4: Transcriptie
1. RNA
Van dubbelstrengig DNA wordt een enkelstrengig RNA gemaakt.
De R staat voor ribose dus geen deoxyribose (op de 2’ en 3’ een OH)
Heeft U ipv T
Is enkelstrengig
Is instabiel het breekt heel snel af; hydrolyse die gekatalyseerd
wordt.
RNA kan dubbelstrengig zijn met allemaal 3D structuren waarbij er stukjes
hybridiseren en dan weer niet en dan weer wel... Hierdoor kan RNA een
heel specifieke structuur krijgen.
Vroeger dachten ze dat ribosomaal RNA ging coderen. Ze wouden dat
bewijzen. Als je E-colis besmet met een bacteriofaag
gaan die E-colis eiwitten maken. Om deze eiwitten te
maken moet er een RNA afschrift gemaakt worden.
Het moment van infectie wordt er een RNA
geïnduceerd en men dacht dus dat er ribosomen
gingen coderen voor DNA.
1. Men nam E-colis in een medium met N14 en C12
(normaal).
2. Dan deden ze E-colis is medium met N15 en C13 (niet-radioactief), deze
hebben een hogere densiteit. Deze ribosomen gaan zwaarder zijn en dus
lager zitten in de proefbuis.
3. Dan gingen ze E-colis van medium 2 transfereren naar een medium met
N14 en C12. Je centrifugeert die en de pellet geeft je terug medium met
alleen lichte isotopen. Je krijgt bacteriën die de ribosomen nog hebben en
bacteriën met het nieuwe medium nieuwe ribosomen maken (de nieuwe
hebben dus een lagere densiteit).
4. We nemen dan weer E-colis van medium 2 we zetten die in een medium
met N14 en C12 en infecteren die met bacteriofagen. Ze maken dus enkel
nog bacteriofaageiwitten. Om het RNA dat dit doet te labelen hebben ze
P32 (radioactief) toegevoegd. Al het nieuwe RNA, geïnduceerd door die
bacteriofagen, zal radioactief zijn. Ze dachten dus dat er nog oude
ribosomen ging zijn en dan nog radioactieve. Dit was niet zo, ze zagen dat
de oude ribosomen die nog aanwezig waren van toen ze groeiden in het
zware medium, die associeerden met nieuwe RNA’s. Er werden geen
nieuwe ribosomen gemaakt maar het waren de bestaande ribosomen
21
1. RNA
Van dubbelstrengig DNA wordt een enkelstrengig RNA gemaakt.
De R staat voor ribose dus geen deoxyribose (op de 2’ en 3’ een OH)
Heeft U ipv T
Is enkelstrengig
Is instabiel het breekt heel snel af; hydrolyse die gekatalyseerd
wordt.
RNA kan dubbelstrengig zijn met allemaal 3D structuren waarbij er stukjes
hybridiseren en dan weer niet en dan weer wel... Hierdoor kan RNA een
heel specifieke structuur krijgen.
Vroeger dachten ze dat ribosomaal RNA ging coderen. Ze wouden dat
bewijzen. Als je E-colis besmet met een bacteriofaag
gaan die E-colis eiwitten maken. Om deze eiwitten te
maken moet er een RNA afschrift gemaakt worden.
Het moment van infectie wordt er een RNA
geïnduceerd en men dacht dus dat er ribosomen
gingen coderen voor DNA.
1. Men nam E-colis in een medium met N14 en C12
(normaal).
2. Dan deden ze E-colis is medium met N15 en C13 (niet-radioactief), deze
hebben een hogere densiteit. Deze ribosomen gaan zwaarder zijn en dus
lager zitten in de proefbuis.
3. Dan gingen ze E-colis van medium 2 transfereren naar een medium met
N14 en C12. Je centrifugeert die en de pellet geeft je terug medium met
alleen lichte isotopen. Je krijgt bacteriën die de ribosomen nog hebben en
bacteriën met het nieuwe medium nieuwe ribosomen maken (de nieuwe
hebben dus een lagere densiteit).
4. We nemen dan weer E-colis van medium 2 we zetten die in een medium
met N14 en C12 en infecteren die met bacteriofagen. Ze maken dus enkel
nog bacteriofaageiwitten. Om het RNA dat dit doet te labelen hebben ze
P32 (radioactief) toegevoegd. Al het nieuwe RNA, geïnduceerd door die
bacteriofagen, zal radioactief zijn. Ze dachten dus dat er nog oude
ribosomen ging zijn en dan nog radioactieve. Dit was niet zo, ze zagen dat
de oude ribosomen die nog aanwezig waren van toen ze groeiden in het
zware medium, die associeerden met nieuwe RNA’s. Er werden geen
nieuwe ribosomen gemaakt maar het waren de bestaande ribosomen
21
