Naam: Yilska Smet Docent: S. Van Vooren
Datum: 16/10/2020 OPO: Labo farmaceutische analyse II
Groep: 2FBTa
Fotometrische bepaling van Riboflavine
1. Doel [1]
Het bepalen van de concentratie van onbekende Riboflavine oplossingen via een
fotometrische bepaling. Daarnaast wordt ook de lineairiteit en de herhaalbaarheid van de
proef onderzocht.
2. Principe[1]
Indien Riboflavine opgelost wordt in water, zal het zijn maximumabsorptie bereiken bij een
golflengte van 446 nm. De absorbanties van de oplossingen worden gemeten en er wordt
met deze gegevens een kalibratielijn opgesteld waaruit de concentratie van de onbekende
oplossingen kunnen berekend worden.
Opmerking:
Riboflavine is lichtgevoelig, daarom worden alle maatkolven waar riboflavine-oplossingen in
komt, omhult in aluminiumfolie. Ook is Riboflavine moeilijk oplosbaar, waardoor er gebruikt
gemaakt wordt van een ultrasoonbad om het oplossen vlotter te laten verlopen. We wegen
ook maximum 65,0 mg riboflavine af, zeker niet meer. Dit door de slechte oplosbaarheid in
water.
3. Gebruikte toestellen
- Analytische Balans : AWS04 M312
- Ultrasoonbad
- Fotometer: Genesys UV-Vis (Golflengte: 446nm)
- Droogstoof Memmet M312
4. Reagentia
Stock : Riboflavine
Mr = 376,4 g/mol
M = 65,0 mg = 0,065 g
V = 1000 ml = 1,000 l
mtheoretisch = 0,065 g
mpraktisch = 0,0651 g
Cpraktisch = 65,1 mg/l
, 5. Onbekenden
Voor de onbekenden (1 en 2) van dit experiment worden twee droge (uit de droogstoof)
erlenmeyers genomen en gevuld met 50,00 ml Stock oplossing ingediend bij de docent.
Uit de teruggekregen onbekende oplossing wordt 25,00 ml gehaald en overgebracht naar
een maatkolf van 50,00 ml en deze wordt daarnaaangelengd met AD.
6. Resultaten + verwerking
Tabel 1 : Meetwaarde verdunningsreeks
Kolf: Stock (ml) AD C theoretisch C A (446nm) A (446nm)
(mg/l) praktisch theo Prak
(mg/l)
1 5,00 Aanvullen 6,50 6,51 0,211
2 10,00 tot 13,0 13,0 0,421
3 15,00 50,00ml 19,5 19,5 0,611
4 20,00 26,0 26,0 0,820
5 25,00 32,5 32,6 1,041
6 30,00 39,0 39,1 1,16 1,234
7 35,00 45,5 45,6 1,36 1,445
8 40,00 52,0 52,1 1,54 1,638
9 45,00 58,0 58,6 1,73 1,810
10 50,00 65,0 65,1 1,92 2,006
O1 25,00 ? ? 0,748
O2 25,00 ? ? 0,758
mg
65,0 ∗Vstock
Ctheoretisch = L
50,00 ml
mg
65 ,1 ∗Vstock
Cpraktisch = L
50,00 ml
Kalibratielijn
Grafiek 1 : Kalibratielijn
Datum: 16/10/2020 OPO: Labo farmaceutische analyse II
Groep: 2FBTa
Fotometrische bepaling van Riboflavine
1. Doel [1]
Het bepalen van de concentratie van onbekende Riboflavine oplossingen via een
fotometrische bepaling. Daarnaast wordt ook de lineairiteit en de herhaalbaarheid van de
proef onderzocht.
2. Principe[1]
Indien Riboflavine opgelost wordt in water, zal het zijn maximumabsorptie bereiken bij een
golflengte van 446 nm. De absorbanties van de oplossingen worden gemeten en er wordt
met deze gegevens een kalibratielijn opgesteld waaruit de concentratie van de onbekende
oplossingen kunnen berekend worden.
Opmerking:
Riboflavine is lichtgevoelig, daarom worden alle maatkolven waar riboflavine-oplossingen in
komt, omhult in aluminiumfolie. Ook is Riboflavine moeilijk oplosbaar, waardoor er gebruikt
gemaakt wordt van een ultrasoonbad om het oplossen vlotter te laten verlopen. We wegen
ook maximum 65,0 mg riboflavine af, zeker niet meer. Dit door de slechte oplosbaarheid in
water.
3. Gebruikte toestellen
- Analytische Balans : AWS04 M312
- Ultrasoonbad
- Fotometer: Genesys UV-Vis (Golflengte: 446nm)
- Droogstoof Memmet M312
4. Reagentia
Stock : Riboflavine
Mr = 376,4 g/mol
M = 65,0 mg = 0,065 g
V = 1000 ml = 1,000 l
mtheoretisch = 0,065 g
mpraktisch = 0,0651 g
Cpraktisch = 65,1 mg/l
, 5. Onbekenden
Voor de onbekenden (1 en 2) van dit experiment worden twee droge (uit de droogstoof)
erlenmeyers genomen en gevuld met 50,00 ml Stock oplossing ingediend bij de docent.
Uit de teruggekregen onbekende oplossing wordt 25,00 ml gehaald en overgebracht naar
een maatkolf van 50,00 ml en deze wordt daarnaaangelengd met AD.
6. Resultaten + verwerking
Tabel 1 : Meetwaarde verdunningsreeks
Kolf: Stock (ml) AD C theoretisch C A (446nm) A (446nm)
(mg/l) praktisch theo Prak
(mg/l)
1 5,00 Aanvullen 6,50 6,51 0,211
2 10,00 tot 13,0 13,0 0,421
3 15,00 50,00ml 19,5 19,5 0,611
4 20,00 26,0 26,0 0,820
5 25,00 32,5 32,6 1,041
6 30,00 39,0 39,1 1,16 1,234
7 35,00 45,5 45,6 1,36 1,445
8 40,00 52,0 52,1 1,54 1,638
9 45,00 58,0 58,6 1,73 1,810
10 50,00 65,0 65,1 1,92 2,006
O1 25,00 ? ? 0,748
O2 25,00 ? ? 0,758
mg
65,0 ∗Vstock
Ctheoretisch = L
50,00 ml
mg
65 ,1 ∗Vstock
Cpraktisch = L
50,00 ml
Kalibratielijn
Grafiek 1 : Kalibratielijn
