ARBEITSTECHNIKEN
, Auto
radiografie
:
Stoffen in Zellen oder durch radioaktive Isotope
Sichtbarmachung Organismus
-
von
-
in den untersuchenden Stoffen werden
zu Oz z.B -
oder C Atome durch radioaktive
-
Isotope dieser Elemente
ersetzt
markierte Stoffe werden im Stoffwechsel einer Zelle oder
Organismus wie nicht markierte Stoffe umgesetzt
-
beim Zerfall der Isotope freiwerdende
Strahlung kann erfasst werden
-
Stoffe
Ermittlung der Lage derReaktions Ketten sie
welchen verarbeitet werden
Ermittlung ,
in
PCR
Ziel
Vervielfältigung DNA
:
von
Vorgehen
:
Versuchsansatz enthält zu
vervielfältigende doppelsträngige DNA hitzebeständige DNA-Polymerase
-
,
Haq Polymerase) 4 Nukleotide der DNA Primer
spezifischer
-
, ,
94°C)
Denaturierung Zerlegung Primer
d Einzel
DNA in
strange (
:
.
stränge (50-704)
'
2.
Hybridisierung Anlagerung an 3 Ende der DNA Einzel
-
: -
3. Amplifikation Synthese der komplementären Stränge durch
DNA-Polymerase ausgehend von
:
,
Primen (70°C)
40 ✗
Wiederholung
-
Gelelektrophorese :
Ziel
Trennung unterschiedlicher Moleküle einer Lösung
:
Gel (molekularer Filter) wird mit den in enthaltenen Moleküle (DNA) befüllt
Vorgehen Lösung
:
-
und unter
Gleichspannung gesetzt
Größe und Gestalt wandern Moleküle unterschiedlich schnell durch
abhängig von
Ladung
-
,
das Gel
-
DNA (
negatives Molekül) bewegt sich von Kathode (Minus -
Pol ) zur Anode (Plus Pol -
)
Visualisierung der Moleküle durch radioaktive oder Fluoreszenzfarbstoff
Markierung
-
-
↳
spezifische Banden muster
zur Großen verschiedenen DNA lässt
bestimmung der
Fragmente parallel mit
-
man
-
Proben DNA Molekül nassenStandard in Gel mitlaufen Gel enthält DNA ( Fragmente mit
-
-
bekannter Größe )
^
, Auto
radiografie
:
Stoffen in Zellen oder durch radioaktive Isotope
Sichtbarmachung Organismus
-
von
-
in den untersuchenden Stoffen werden
zu Oz z.B -
oder C Atome durch radioaktive
-
Isotope dieser Elemente
ersetzt
markierte Stoffe werden im Stoffwechsel einer Zelle oder
Organismus wie nicht markierte Stoffe umgesetzt
-
beim Zerfall der Isotope freiwerdende
Strahlung kann erfasst werden
-
Stoffe
Ermittlung der Lage derReaktions Ketten sie
welchen verarbeitet werden
Ermittlung ,
in
PCR
Ziel
Vervielfältigung DNA
:
von
Vorgehen
:
Versuchsansatz enthält zu
vervielfältigende doppelsträngige DNA hitzebeständige DNA-Polymerase
-
,
Haq Polymerase) 4 Nukleotide der DNA Primer
spezifischer
-
, ,
94°C)
Denaturierung Zerlegung Primer
d Einzel
DNA in
strange (
:
.
stränge (50-704)
'
2.
Hybridisierung Anlagerung an 3 Ende der DNA Einzel
-
: -
3. Amplifikation Synthese der komplementären Stränge durch
DNA-Polymerase ausgehend von
:
,
Primen (70°C)
40 ✗
Wiederholung
-
Gelelektrophorese :
Ziel
Trennung unterschiedlicher Moleküle einer Lösung
:
Gel (molekularer Filter) wird mit den in enthaltenen Moleküle (DNA) befüllt
Vorgehen Lösung
:
-
und unter
Gleichspannung gesetzt
Größe und Gestalt wandern Moleküle unterschiedlich schnell durch
abhängig von
Ladung
-
,
das Gel
-
DNA (
negatives Molekül) bewegt sich von Kathode (Minus -
Pol ) zur Anode (Plus Pol -
)
Visualisierung der Moleküle durch radioaktive oder Fluoreszenzfarbstoff
Markierung
-
-
↳
spezifische Banden muster
zur Großen verschiedenen DNA lässt
bestimmung der
Fragmente parallel mit
-
man
-
Proben DNA Molekül nassenStandard in Gel mitlaufen Gel enthält DNA ( Fragmente mit
-
-
bekannter Größe )
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